水生动物病原体基因组DNA/RNA提取试剂盒(FAST)
创建时间:2026-01-19 15:39
水生动物病原体基因组DNA/RNA提取试剂盒(FAST)
价格:500元/盒
一、简介
水生动物病原体基因组DNA/RNA提取试剂盒(FAST)适合于快速从动物组织匀浆液中提取高纯度的病
原基因组DNA和RNA。本试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,也无需进行耗时
的醇类沉淀,获得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern杂交/Northern杂交、以及LAMP/RT-LAMP等下游实
验。
二、原理
本试剂盒采用的硅胶柱以高结合力的玻璃纤维滤膜为基质。滤膜在高浓度离子化剂(如盐酸胍或异硫氰
酸胍)条件下,可通过氢键和静电等物理化学作用吸附核酸,而蛋白质和其它杂质则不被吸附而去除。吸附
了核酸的滤膜经洗涤去除残留的蛋白质和盐,最后可以用DEPC处理水洗脱滤膜上吸附的核酸,得到的核酸纯
度高,可直接用于各种下游实验。
水生动物病原体基因组DNA/RNA提取试剂盒(FAST)基于硅胶柱纯化方式。样品在裂解液中裂解,核
酸释放到裂解液中。在高盐的环境下通过硅胶柱,核酸被吸附在硅胶柱的膜上,蛋白质则不被吸附而去除。后经洗涤
液洗涤去除盐分,最后核酸被无核酸酶洗脱液洗脱。
三、组成(48T)
499169M
组分 含量
离心柱(套管) 48个
溶液1 25mL
溶液2 60mL
溶液3 10mL
说明书 1份
四、保质期
可在室温下(15-25℃)干燥保存18 个月。长期保存时需置于 2-8℃。
五、需要准备的材料和工具
无菌生理盐水
洁净的镊子和剪刀
匀浆机、均质袋或一次性研磨棒
微量移液器(100-1000 μL,10-100 μL)
无DNase/RNase 的灭菌离心管(1.5 mL 或2 mL)
无DNase/RNase 的灭菌吸头
涡旋振荡器
离心机(转速≥10,000 rpm)
六、从动物组织中快速提取病原基因组 DNA 的方法
(一)样本前处理:
1.虾苗、鱼苗、动物组织(例如大虾组织、鱼组织、丰年虫幼虫、软体动物组织等)样本:取约3~5g样本放入均
质袋中,加入3倍体积生理盐水,充分研磨样本。
2.成虫:取5~10条青虫(红虫)样本,每条青虫剪取2~3cm,放入均质袋中,加入3倍体积生理盐水,充分研磨
样本。
3.虾片样本:取约2~4g放入均质袋中,加入4倍体积生理盐水,充分研磨样本。
4.养殖水样本:用滤纸过滤杂质,再用孔径0.22µm水系滤膜(水系滤膜不易堵塞)进行过滤(滤膜可以截留细菌性病原体如EHP、弧菌等),过滤1L以上养殖水后,取出滤膜,剪成小块后放入离心管中,加入生理盐水 没过滤膜,涡旋震荡。
(二)核酸提取:
1.用巴氏吸管吸取匀浆液,滴入4滴(约200μL)匀浆液至1.5mL离心管中,加入400µL溶液1至离心管中,振
荡混匀30秒。室温放置5-10分钟,10,000rpm离心3分钟去除杂质。
2.取出离心柱(套管),尽可能多的转移前一步上清液至柱子中(注意不要吸到沉淀物),10,000rpm离心1分
钟。
3.倒弃滤液后把柱子套回收集管中,加入500µL溶液2至柱子中,10,000rpm离心1分钟。
4.重复第3步操作一次。
5.倒弃滤液后把柱子套回收集管中,10,000rpm离心2分钟,甩干柱子。
6.将柱子转移至新的1.5mL离心管,加入100µL溶液3至柱子的膜中央。室温静置1分钟,10,000rpm离心1分
钟。
7.弃去柱子,把DNA/RNA保存于-20ºC,长期保存于-80℃。






